预实验分别选择了超声与水浴回流提取广西余甘子中黄酮类成分,盐炙由基结果发现水浴回流提取出的对广的影黄酮类成分含量较高。随后采用星点设计-效应面法确定黄酮类成分的西余响最佳提取工艺:乙醇浓度60%、提取溶液量95倍、甘中关系提取回流时间5.5 h。黄酮
图3生品的类成聚类分析表明,受不同分布区地理和气候因素影响,分清广西不同地域所产的谱效余甘子质量有差异,结合表5的盐炙由基测定结果,广西玉林产余甘子质量较稳定。对广的影四批广西梧州同一产地的西余响IC50最大值0.630 mg·mL-1与最小值0.345 mg·mL-1相差近一倍,三批广西钦州同一产地的甘中关系IC50最大值1.174 mg·mL-1与最小值0.503 mg·mL-1也相差近一倍。这种同一地域质量差异还可能与当地的黄酮种植栽培条件等因素有关。建议规范化种植,类成保证药材的分清质量稳定。
据文献报道,余甘子中黄酮类化合物具有一定的抗氧化活性。余甘子果实中黄酮类化合物与糖以结合成苷的形式存在,在一定的温度条件下,果实中所含的分解酶将苷分解成糖和含有黄酮类化合物的苷元,同时食盐的渗透作用又可促使植物细胞中的化学成分溶出,使得黄酮类化合物增加。结合表5中生品盐炙后IC50值降低,显示清除DPPH自由基作用增强,说明余甘子盐炙后清除DPPH自由基作用的增强与黄酮类化合物的增加有关。
表4中13批盐炙品中有12批黄酮类成分的HPLC指纹图谱相似度分析结果均在0.9以上,说明这12批不同产地的样品经盐炙后主要化学成分相差不大。表6盐炙前指纹图谱中20个特征共有峰与清除DPPH自由基作用的关联度均大于0.65,表7盐炙后这20个特征共有峰与清除DPPH自由基作用的关联度均大于0.70,说明盐炙前后这20个特征共有峰所代表的化学成分均参与了清除DPPH自由基作用,并且清除DPPH自由基作用是这20个化学成分组成的化学成分群共同作用的结果。表5盐炙后13批样品的IC50值均降低,提示盐炙后清除DPPH自由基作用增强。盐炙后这20个特征共有峰对清除DPPH自由基作用的贡献大小发生了较大变化,说明盐炙后这20个化学成分组成的化学成分群在共同作用的同时,每个化学成分的含量发生了改变,使得其对清除DPPH自由基作用的贡献大小发生了变化。后续将对盐炙前后广西余甘子中黄酮类特征共有峰进行定性和定量分析,探讨这20个化学成分组成的化学成分群对清除DPPH自由基作用的量效变化,为广西余甘子盐炙品的质量控制和评价提供参考。
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